Inflamación en el tejido óseo de ratas inducida por fluoruro de sodio / Inflammation in rat bone induced by sodium fluoride

El fluoruro de sodio (NaF) y el monofluorofosfato de sodio (MFP) son compuestos que generan fluoruro, siendo capaces de aumentar ladiferenciacióny proliferaciónde precursores osteoblóticos. El NaF ha demostrado incrementar la densidad mineral óea de la cadera y la columna vertebral, aunque todavía existen controversias en relació con la calidad del hueso neoformado. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las modificaciones histopatológicas del hueso neoformado y los cambios morfométricos óseos bajo el tratamientocon NaF y MFP. Se utilizaron ratas hembras de 21 días de edad las que se dividieron en 3 grupos (n=8 por grupo): grupo control = 1 ml agua/día; grupo NaF = 80 Ìmol NaF/día; y grupo MFP = 80 Ìmol MFP/día. Se obtuvieron las tibias y femures para los siguientes analisis: 1. Analisis histomorfomítrico a nivel del hueso trabecular (volumen óseo trabecular, espesor y ancho trabecular); 2. Analisis morfométricode hueso cortical (area y ancho cortical, perimetro peristico y endostico); 3. Ensayo biomecanico de flexión a tres puntos; 4. Analisis histopatológico. Se halló que a nivel trabecular, tanto el NaF como el MFP mostraron aumento del volumen óseo. A nivel de la diafisis ninguen tratamiento modificó el anchocortical y la carga de fractura a la flexión en ensayo a tres puntos no evidenció diferencias significativas entre los grupos. El analisis histopatológico de los huesos de ratas tratadas con NaF mostró...

Expresión de células CD11b-positivas en mucosa rectal de conejos sensibilizados y desafiados con ovoalbúmina / CD11 b-positive cells expression in rectal mucosa from ovalbumin sensitized and challenged rabbits

El receptor MAC-1 de conejo, homólogo al CD11b humano, es una proteína presente en los macrófagos. El objetivo del presente trabajo es establecer las modificaciones cuantitativas y distributivas de células CD11bpositivas participantes en la respuesta inmune a nivel de la mucosa rectal, en un modelo animal de inmunidad mucosa. Se estudiaron conejos neocelandeses divididos en tres grupos: G1:control, G2:sensibilizado con ovoalbúmina (OVA) y G3:sensibilizado y desafiado por vía rectal con OVA. Los conejos de los grupos 2 y 3 fueron sensibilizados por vía subcutánea en dos oportunidades, con 2 ml de una suspensión de 70 µg de OVA en 30 mg de hidróxido de aluminio/ml. El desafío rectal se realizó con una solución de 50 mg OVA en 5 ml de solución salina. La prueba de anafilaxia cutánea pasiva (PCA) fue positiva en G2 y G3 a una dilución de 1/160. En el grupo sensibilizado y desafiado se observó edema mucoso parcheado, imágenes de linfangiectasias e infiltración de eosinófilos. Las células se contaron como número de células por campo de mayor ...

Modelo biológico para la detección de antígenos alimentarios / Biological model for detection of food antigens

Antigenic macromolecules present in food can induce inflammatory allergic reaction in sensitized persons. The aim of the present work is the development of an animal model to detect food antigens based on hypersensitivity reaction after food ingestion. New Zealand rabbits were divided in 5 groups. Group 1 (GI): control. G2: Ovalbumin (OVA) sensitized. G3: sensitized and orally challenged with OVA. G4: OVA sensitized and phosphate buffer solution challenged (PBS). G5: sensitized and challenged with OVA. Samples from cecum were stained with Alcian Blue pH < 1 for mast cells and with silver method for enteroendocrine cells (EEC). Other samples were immunostained with anti CD5 and CD25 monoclonal antibodies. Specific IgE levels were detected by PCA. Histopathology of G5 showed patchy edema, lymphangiectasia and eosinophilic infiltration. Results were expressed as cells per HPF (high power field); Mast cells in G1: 1.33; G2: 12.80 and G5: 10.20. Enteroendocrine cells in surface epithelium: G1: 1.6; G2: 6.0; G5: 4.2 and in deep epithelium: G1: 3.0; G2: 12.0 and G5: 7.3. Lymphocytes CD5+ in G1: 24.21: G2: 22.12 and G5: 23.97 and CD25+ in G1: 12.10: G2: 14.30 and G5: 21.68. Group 3 were similar to G1 and G4 to G2. We observed: mast cells increased in number probably due to OVA induced response. EEC showed an increase in sensitized animals because of higher expression of cytoplasmatic granules or differentiation from stem cells. Decrease in EEC number in challenged groups was likely to be based on vesicles release. Total T cells showed no significant differences among groups. CD 25+ cells were higher in sensitized and challenged animals. We concluded that rabbit model of sensitization and oral challenge is valid to study ingested food antigens and potential digestive pathologic reactions.

Modificaciones de las células enteroendocrinas en gastritis por Helicobacter pylori / Enteroendocrine cells modifications in Helicobacter pylori gastritis

Objetivo: Estudiar las modificaciones en número y distribución de las células entero endocrinas (CEE) en el antro gástrico de pacientes con infección por Helicobacter pylori (HP), para demostrar su participación en la respuesta inmune. Material y Método: Se utilizaron biopsias de antro gástrico de veintiseis (26) pacientes, entre 40 y 60 años de edad. Las muestras se colorearon con HE y giemsa modificado e inmunomarcaron con Cromogranina A. Cinco pacientes integraron el grupo control. Once pacientes mostraron gastritis crónica activa y los diez restantes gastritis atrófica multifocal (AMF), ambas asociadas a HP. Las CEE se cuantificaron refiriéndoselas cada 100 células epiteliales y se evaluó el patrón de distribución de las mismas. Resultados: En antros de pacientes controles (normales), la distribución de las CEE relacionadas fue uniforme con una media de 19,51 CEE/100. En los procesos inflamatorios, se detectó 12.01 CEE/100 en las gastritis crónicas y 6.31 CEE/100 en las AMF. Asimismo se observó una distribución irregular de las CEE relacionadas con áreas inflamatorias o con folículos linfoides. Conclusiones: La disminución de las CEE correspondería a una degranulación y luego debido a la agresión del HP, a la desaparición o inhibición de las stem cell hacia la línea endócrina. La persistencia de CEE en proximidad a las áreas de mayor infiltrado inflamatório, sugeriría su participación modulando esta respuesta, probablemente liberando péptidos que interactúan con linfócitos T, macrófagos y eosinófilos. Las CEE en el antro gástrico tendrían una intervención activa en la reacción inmune provocada por el HP.

Células enteroendocrinas intraepiteliales en ciego y apéndice de conejos sensibilizados con ovoalbumina / Intraepithelial enteroendocrine cells in cecum and appendix from ovalbumin sensitized rabbits

Las células enteroendócrinas se relacionan con la motilidad, secreción y absorción de nutrientes. Actualmente está en estudio su relación con la respuesta inmune. El ciego y el apéndice del conejo, contienen en su luz bacterias y nutrientes en distintas etapas de digestión, con potencial acción antígenica. En el presente trabajo se evalúan las modificaciones en número y distribución de las células enteroendócrinas intraepiteliales en ciego y apéndice cecal de conejos sensibilizados con ovoalbúmina (OVA). Se utilizaron conejos neozelandeses adultos divididos en dos grupos, G1: grupo control (n=10). G2: sensibilizados vía intraperitoneal con OVA (n=10). Muestra de ciego y apéndice se fijaron en formol buffer al 10 por ciento marcándose las células enteroendócrinas con anticuerpo monoclonal anti-cromogranina A. En cada animal se contaron 400 campos microscópicos a mayor aumento, refiriéndose el número de células enteroendócrinas cada 100 enterocitos. En ciego se consideró epitelio superficial y criptal, mientras que en apéndice, epitelio superficial, criptas superficiales y criptas profundas. En epitelio superficial de ciego se hallaron 1,6 CEI/100 enterocitos en epitelio superficial y 3/100 en criptas. En G2 6 CEI/100 en epitelio superficial y 12/100 en criptas. La diferencia entre G1 y G2 fue estadísticamente significativa (p<0,05). En apéndice el epitelio superficial del G1 mostró 5,2/100 mientras que en G2 fue de 5.4/100 (no significativo). Las criptas superficiales evidenciaron 8,5/100 (G1) y 11.3/100 (G2) (p<0,05). En criptas profundas 4,9/100 (G1) y 8,5/100 (G2) (p<0,05). En los animales sensibilizados se detectó aumento significativo en la cantidad de células enteroendócrinas en ambos órganos. Dicho incremento podría atribuirse a un aumento de los gránulos intracitoplasmáticos o a la diferenciación de células generatrices a células APUD, como respuesta a la sensibilización.

Poblacion intraepitelial de linfocitos T en ileon de conejos sensibilizados con ovoalbumina / Intraepithelial T cell population in ileum from ovalbumin sensitized rabbit

Se caracterizó la población de linfocitos T intraepiteliales del íleon terminal de conejos neozelandeses sensibilizados com ovoalbúmina por vía intraperitoneal y desafiados por vía oral. Los nivels de IgE anti-OVA obtenidos durante la sensibilización se evaluaron mediante el test de anafilaxia cutánea pasiva (PCA) positiva para una dilución de 1/160. La respuesta anafilácticta en el intestino luego del desafío oral fue confirmada por la aparición de edema en la vellosidad y marcada degranulación mastocitaria. Se analizaron en cada tejido, células T totales (CD5+), subpoblación de linfocitos T (CD4+) y células que expresaron MHC II R-RQ (marcador de activación celular). Las células positivas se contaron en 30 vellosidades por animal, presentándose los valores como número de células positivas cada 1000 núcleos de células absortivas. El número de células CD5+ en el grupo experimental fue de 122.5/1000 núcleos. Las que expresaron marcadores de activación (MHC II R-RQ) mostraron un incremento: 32.2 en el grupo experimental 8 horas luego del desafío comparado com el grupo control: 12.6 células positivas/1000 núcleos (p<0.05) y dentro del grupo experimental entre los sacrificados a la hora y a las 8 horas (9.3 vs. 32.2). p<0.05. Se demuestra un incremento de células T activadas en el epitelio del íleon terminal en el grupo experimental sensibilizado con ovoalbúmina 8 horas después del desafío oral.